9 квітня у Моз визнали, що 20-30% російських ПЛР-тестів для виявлення COVID-19 дають псевдонегативний результат, і заявили, що найбільш точним способом діагностики хворих COVID-19 є томографія. При цьому раніше, 6 квітня, Росздравнадзор зареєстрував експрес-тест для виявлення COVID-19, розроблений групою компаній «Медико-біологічний союз» з Новосибірська. Експрес-тест нібито здатний визначати наявність захворювання за 40 хвилин, а заявлена точність становить 94%.
Олег Гусєв, провідний науковий співробітник науково-клінічного центру прецизійної та регенеративної медицини Казанського федерального університету і провідний співробітник інституту фізико-хімічних досліджень RIKEN (Японія), брав участь в розробці изотермального тесту на COVID-19, розповів The Insider, чому російські тести на коронавірус, як правило, дають псевдонегативний результат, з чим пов’язаний недолік тестів в Росії та інших країнах і як йдуть справи з тестуванням в Японії.
— Як ви вважаєте, хибнонегативні тести — неминуче зло чи це залежить від якості тесту?
— Псевдонегативний результат може бути пов’язаний з будь-яким етапом тестування. Навіть якщо це тест з нормальною чутливістю (що в російському випадку — не завжди так), то там ще багато додаткових моментів. В країні не розвинена культура проведення аналізів на РНК віруси (грипу типу і коронавіруса) за місцем лікування. А це ж виділення РНК, вона швидко розпадається і тут практика тестів ДНК і РНК тестів мають свої специфіки. Так що я б сказав, що там 90% людського фактора від забору мазка до умелости капання і якості реагентів. Так що “неминучого зла” там менше ніж виключно об’єктивних факторів, на мій погляд. Візуалізація легенів — просто підхід, де ці фактори ризику різко нижче. Тому у них така позиція: якщо тест позитивний — це COVID, якщо негативний, але ви бачите чіткий фенотип — вірте очам.
— Наскільки велика собівартість тестування?
— Важко сказати. Можна уявити, скільки коштує зробити один тест. В залежності від ситуації і якості компонентів, це може бути і 1, і 10, і 20 доларів. Наприклад, ми у практиці бачили, що від виробника одного з компонентів тіста залежить 50% його чутливості. Нею не можна жертвувати, тому розробникам доводиться купувати дорогі складові. До того ж, коли все це доходить до лабораторії, на це вже навісити додаткові витрати, плюс амортизація обладнання, плюс оплата часу співробітників. Тому собівартість виробництва і ціна для споживача — це дуже різні речі. Наприклад, ціна виробництва одного тесту ІФА [імуноферментний аналіз] на грип в Японії близько 100-150 ієн (1-2 долари), без страховки в лікарні зробити такий тест коштує близько 7 000 ієн (60 доларів). І це цілком об’єктивні «накрутки».
— Це тому що в Японії робота дорога, напевно, а у нас працю дешевше, але середня кваліфікація нижче?
— Годину роботи медсестри, напевно, 30 доларів в Японії, це теж впливає. Ну і розробка письмового тесту, а особливо якогось незвичайного, типу изотермального ПЛР, де результат визначається за 15 хвилин, теж коштує величезних грошей і зусиль, і їх потрібно компенсувати. Тут логіка як з онкологічними ліками, виробництво яких коштує копійки, але перші роки для пацієнтів вони стоять золоті гори, інакше ніхто б нічого не розробляв. У РФ зараз читав ряд статей про те, що кляті комерсанти продають тести на коронавірус дорожче ніж «від Вектора». Так вони самі свої гроші вкладали щоб зробити хороший продукт, а всякі вектори роблять їх на наші з вами гроші від податків. Це ж серйозний фактор.
— А як ви думаєте, які можуть бути ризики, якщо будуть тестувати в основному за допомогою КТ, а не ПЛР?
— Наскільки я розумію, не будуть так тестувати. КТ — це дуже неспецифічна, хоча і, мабуть, чутливо. Ставити діагнози по КТ буде важко. Але для COVID-19 зараз немає спеціального лікування якого-то, наскільки я розумію, тому можливо користі буде більше, якщо для негативних по ПЛР, але схожих за КТ» випадків будуть застосовуватися підходи як для COVID-19.
— Але тільки таким чином можуть покласти людей без коронавіруса разом із зараженими і отримати більше хворих…
— Так, це так. Мабуть користь такого підходу ми дізнаємося експериментальним шляхом і в процесі накопичення досвіду фахівців з КТ. На жаль, зараз експерименти йдуть «по живому», іншого виходу немає. Ну і «класти» будуть людей з близькою симптоматикою зовнішньої, мені, як неспеціалісту, здається, що це мало вплине на успішність лікування і смертність. Краще «перестрахуватися», якщо, дійсно все крім тесту на ПЛР, незрозуміло де і на чому зробленого, говорить про те що це COVID-19. Ну і «не всі тести однаково корисні», мабуть. Через якийсь час все устаканиться і чутливість використовуваних рішень буде вище і результати надійніше. Всі перейдуть на якесь оптимальне рішення і проблема з хибно негативними випадками спаде.
– Справді можливі повторныне зараження або це теж швидше за все помилкові тести?
— Сам я не візьмуся сказати, але мої колеги сходяться в тому, що це проблема з недотестированием в процесі лікування. Тобто це не вдруге, а продовження першого. Але скоро ми будемо знати більше з цього приводу. Весь світ набирає дані.
— А з приводу тестів на антитіла, як ви вважаєте, коли вони масово з’являться в Росії і чому вони так пізно з’явилися взагалі? Наскільки вони дорожче ПЛР-тестів?
— Розробка ІФА-тестів вимагає значної кількості зразків від реально перехворіли коронавірусом. Крім того, серйозні розробники піклуються про специфічність (тобто відсутність крос-реакції з антитілами на інші коронавіруси, наприклад). Традиційно ІФА-тести дешевше ніж ПЛР-тести.
— Чому у Росії дефіцит тестів, це фінансова проблема або технічна, чи можливо було взагалі технічно налагодити масове виробництво тестів в стислі терміни?
— У Росії генетичне тестування на ГРВІ взагалі не розвинене поза спеціалізованих лікувальних закладів (та й там це дуже регламентовано). А зараз ми маємо справу з необхідністю тестувати сотні тисяч людей одночасно. Ні виробники, ні лабораторії до такого потоку і такої затребуваності не були готові. Масштабування виробництва тестів, наскільки я розумію, це теж окрема проблема. Для реакції ПЛР необхідний цілий набір компонентів, який часто залежить від ряду незалежних постачальників. Не кажучи вже про те, що розробка гарного тесту вимагає часу, — потрібна значна робота по оцінці реальної чутливості, специфічності, стабільності зберігання і т. п.
— А як у Японії йде справа з доступністю тестів?
— В Японії направлення на тестування з COVID-19 до теперішнього часу досить жорстко регламентовано. Тобто пацієнт повинен володіти рядом ознак пневмонії, що б його перевірили саме на COVID-19. Це робиться в рамках ОМС. У той же час формат “я йшов по вулиці, захвилювався і на всяк випадок зайшов перевіритися на коронавірус” не присутній. Тому в Японії, наскільки мені відомо, немає ажіотажу та дефіциту тестів.
— Якщо людина заразилася вірусом, але його імунітет впорався з ним настільки добре, що симптоми не проявилися і з вигляду чоловік абсолютно здоровий, — покаже ПЛР-тест на наявність вірусу з такою ж вірогідністю як у сильно хворого? Або тільки тест на антитіла визначить, що він хворів?
— Тест на основі детекції геному патогена (ПЛР-тест) покаже присутність патогена навіть в невеликих кількостях. Розробники, наскільки я знаю, заявляють чутливість від 10 до 1000 копій вірусу на реакцію. Цього в теорії досить, щоб виявляти і безсимптомних носіїв (але пам’ятаємо про особливість практики). В якийсь момент, коли вірус ще в організмі, але імунна система вже активована та ІФА-тести і ПЛР-тести будуть визначати наявність вірусу. Після захворювання ІФА тести будуть визначати, що людина перехворіла. У той же час зараз все більше несистематизованих даних поки, що вірус залишається в організмі людини і після активної фази захворювання.
— Останнє, — чим взагалі ПЛР тести відрізняються один від одного? Відомо, який з доступних в Росії тестів краще за інших і має сенс про це думати, якщо 90% помилок тесту через людського фактора?
— За заявленим характеристикам (хіба що в плані швидкості отримання результату, який у разі изотермальных підходів як мінімум в декілька разів швидше) тести як зарубіжних, так і російських виробників досить близькі один одному. А що вже насправді там відбуваються і всі тести однаково корисні, тут вже історія і розбір польотів після епідемії покажуть.